EDTA抗凝血直接PCR试剂盒—防PCR产物污染体系

产品介绍

本产品采用独特的PCR缓冲液体系，无需DNA提取或样品处理即可以全血样本为模板进行直接PCR。EDTA、Heparin抗凝全血以及含有血液的采集卡(如Whatman 903®和 FTA®采血卡)均可直接用于PCR扩增鉴定，极大的缩短了检测时间。本试剂盒提供的2× SuperEasy^TM Mix具有很强抑制物耐受性，人血作为PCR模板**加入量可达PCR体系的45%，鼠血的可达20%，可以灵敏的扩增血液样本中基因组和外源目的DNA片段。

2× SuperEasy^TM Mix-EDTA包含本公司特有的Foregene D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、Taq Reaction Buffer、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂。

2× SuperEasy^TM Mix(UNG)在2× SuperEasy^TM Mix的基础上用dUTP替代了dTTP，并同时加入能够降解含有dUTP模板的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物，UNG酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。

D-Taq DNA polymerase是Foregene为直接PCR反应专门研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase对多种PCR反应抑制剂具有极强的的耐受性、在各种复杂反应体系中均能高效扩增痕量的DNA，扩增速度可达2Kb/min，特别适合进行直接PCR反应。

根据所用抗凝剂的不同，该产品分为两个大类：EDTA抗凝全血直接PCR试剂盒系列(Blood SuperDirect^TM PCR Kit-EDTA)和Heparin抗凝全血直接PCR试剂盒系列(Blood SuperDirect^TM PCR Kit-Heparin)；也可以根据实验需要选择相应的试剂盒。

试剂盒应用

该试剂盒专用于EDTA抗凝全血直接PCR鉴定。(包括：人血、鼠血、鸡血、鸟血、牛血、狗血等)。

试剂盒局限性

扩增片段≤1kb；超过1kb，扩增效率下降或者扩增失败。

PCR产物可能会有点突变，如用于基因克隆，请知悉。

UNG防PCR产物污染体系得到的PCR产物请勿用于基因克隆或测序。

PCR产物3’末端随机加A尾。

试剂盒内容

2× SuperEasy^TM Mix(UNG)-EDTA：在2× SuperEasy^TM Mix-EDTA的基础上用dUTP替代了dTTP，并同时加入能够降解含有dUTP模板的UNG酶，从而能够有效防止PCR扩增产物污染。包含福际生物特别改造的D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂等。PCR反应时，只需将适当的抗凝全血、引物、ddH₂O添加到相应的2× SuperEasy^TM Mix(UNG)-EDTA中即可用于PCR反应。

6× DNA Loading Buffer：该Loading Buffer中不含有SDS。建议在进行琼脂糖凝胶电泳时，配搭使用试剂盒附赠的6× DNA Loading Buffer，以便取得好的电泳结果。切勿使用含有SDS的Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中有一大团拖尾亮光，影响实验结果。

储存条件

全程低温冰盒运输，保证试剂盒处于＜4℃状态。

本试剂盒保存在-20℃。

v   2× SuperEasy^TM Mix(UNG)-EDTA，若频繁使用，也可置于4℃短期保存(限10天内用完)。

v   6× DNA Loading Buffer，可置于4℃或-20℃长期保存。

操作流程