斑马鱼直接PCR试剂盒—防PCR产物污染体系

产品介绍

本产品采用独特的裂解缓冲液体系可以快速的从斑马鱼等淡水鱼类组织、尾鳍或鱼卵样本中释放出基因组DNA，用于PCR反应，因此特别适合大规模基因检测。

裂解缓冲液释放基因组DNA过程在65℃条件下10-30 min内完成，不需要其他去蛋白、RNA等的过程，即可将释放出的微量DNA作为模板进行PCR反应。

2× PCR Easy^TM Mix具有很强的PCR反应抑制物耐受性，能以待测样本的裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂包含Foregene D-Taq DNAPolymerase、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液、PCR优化剂和稳定剂。与裂解缓冲液配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。

2× PCR Easy^TM Mix(UNG)在2× PCR Easy^TM Mix的基础上用dUTP替代了dTTP，并同时加入能够降解含有dUTP模板的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物，UNG酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。

D-Taq DNA polymerase是Foregene为直接PCR反应专门研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase对多种PCR反应抑制剂具有极强的的耐受性、在各种复杂反应体系中均能高效扩增痕量的DNA，扩增速度可达2Kb/min，特别适合进行直接PCR反应。

试剂盒应用

适用范围：斑马鱼等淡水鱼类。

样本裂解释放的DNA：仅用作PCR模板。

试剂盒可用于以下用途：转基因型鉴定、动物基因分型等。

试剂盒内容

Buffer FP：提供斑马鱼组织裂解反应所需的环境。

Foregene Protease：在裂解缓冲液的环境下，裂解斑马鱼组织，释放基因组DNA。

2× PCR Easy^TM Mix(UNG)：在2× PCR Easy^TM Mix的基础上用dUTP替代了dTTP，并同时加入能够降解含有dUTP模板的UNG酶，从而能够有效防止PCR扩增产物污染。包含福际生物特别改造的D-Taq DNA Polymerase、UDG、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂等。PCR反应时，只需将适当的裂解混合液、引物、ddH₂O添加到2× PCR Easy^TM Mix(UNG)中即可用于PCR反应。

6× DNA Loading Buffer：该Loading Buffer中不含有SDS。建议在进行琼脂糖凝胶电泳时，配搭使用试剂盒附赠的6× DNA Loading Buffer，以便取得好的电泳结果。切勿使用含有SDS的Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中有一大团拖尾亮光，影响实验结果。

储存条件

全程低温冰盒运输，保证试剂盒Part I、Part II处于＜4℃状态。

本试剂盒Part I保存在2-8℃。

v试剂Buffer FP，在干燥条件下，可保存12个月；如需保存更长时间可置于2–8℃。

v   试剂Foregene Protease，具有独特配方，为保证其活性和稳定性，请保存于4℃，保存时间为12个月。

v   试剂6× DNA Loading Buffer，可置于4℃或-20℃长期保存。

本试剂盒Part II保存在-20℃。

v   试剂2× PCR Easy^TM Mix(UNG)，在-20℃条件下可保存12个月；若频繁使用，也可置于4℃短期保存(限10天内用完)。

操作流程